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　2、上诉人在同答辩人签订合同之前，已经找过几家装饰公司进行对比，一家报价为1250000元，最低的一家报价为980000元(工装的利润在45%左右)，而答辩人的工程最终实际总造价为580000元，本不存在利润，只是当做业绩工程及样板工程做的。

　3、在整个施工过程中，每次变更施工方案时，都是经过双方确定认可后才实施的，如上诉人不确定认可也不可能继续施工完成工程。

　4、所有的材料材质也都是经过上诉人确定认可后才能继续施工完成，壁纸也是每卷265元，有原始发货单。楼梯的定制也是按标准定制，而上诉人没有给出具体详细的尺寸，并不是故意缩减楼梯的宽度。

　5、消防验收不能通过是因为KTV内没安装喷淋消防设备，当初

　施工时答辩人特别提出《娱乐行业等公共场所》必须安装喷淋消防设备，但上诉人不予采纳方案，说自己有亲属在那行，可以不安装喷淋消防设备也能通过消防验收。

　这些都是一审法院经过详细的调查、取证，而认定的事实清楚，证据充足，依法应当予以维持。

　二、一审法院在审理本案过程中，完全依法律程序正确审判。

　1、一审法院在第二次开庭审理本案时答辩人接到法院传票传唤，由代理人赵江波到庭参加诉讼，上诉人无正当理由拒不到庭，所以一审法庭做出《民事裁定书》，本案反诉按自动撤诉处理。

　2、导致第二次开庭的原因，不是因为答辩人也不是一审法院，而是由于在20xx年3月15日第一次庭审中，上诉人当庭提出反诉，鉴于此情况，一审法院决定休庭，择日开庭。

　答辩人在20xx年6月8日收到一审法院传票定于20xx年6月13日下午14时30分二次开庭审理本案，6月13日二次开庭答辩人就上诉人提出反诉案，提出三份证据，而上诉人无正当理由拒不到庭参加诉讼，视为放弃诉讼权利以及证据的质证权利。

　综上，一审法院在审理本案过程中，完全依法律程序正确审判。

　三、一审法院适用法律正在早期，其活性具有严格的时限性和兰织细胞特异性。故T细胞在分化成熟过程中只能进行一次有效的基因重排，保证了一个T细胞克隆只能表达一种特异性TCR，只显示一种抗原识别特异性。

两条链基因重排后可形成千万种不同特异性的TCR分子，可识别环境中多种多样的抗原。正是这种随机重排导致的TCR多样化使免疫系统在识别和杀伤特异外源性抗原时更为快速、准确和有效。

过于多样化也是目前免疫组学测序最大的问题。理论上VDJ重排后可产生1015~1020种不同的克隆类型，但实际上只有约1013种不同的克隆类型。这就意味着看似随机的VDJ重排其实是有规律的，并且受到各种条件的限制。

用恒定基因区段重组可变区产生功能性TCR链转录物。这个过程导致强组合（取决于哪个基因区域将重组）和连接多样性（将添加/删除多少核苷酸），从而产生大量且高度可变的TCR profiling，最终鉴定到大量的TCR profiling抗原。通过配对α和β或γ和δ链以形成功能性TCR来实现多样性。

每个TCR链包含三个高可变环区（hypervariable loops）,称之为互补决定区CDR1-3（complementarity determining region 1-3）。CDR1和CDR2由V基因编码，并且对TCR与MHC复合物互作至关重要。然而CDR3由V和J或D和J之间连接区编码，因此CDR3变化程度较大。由于 CDR3是与抗原直接接触的TCR区域 ，因此CDR3在TCR与肽-MHC复合物的相互作用中起到了十分重要的作用。

所以CDR3是T细胞常见的克隆区域，除非T细胞来源于相同的形式扩增出来的，一般来说 T细胞几乎不太可能表达相同的CDR3序列 。

Chromium Next GEM Single Cell 5' Kit v2

10X V(D)J测序与其转录组测序建库流程基本相同，都要经历微流控构建单细胞油包水反应体系，mRNA逆转录为cDNA并扩增的过程。与常规10X单细胞转录组Information Technology

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